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高考生物实验总结1

翟书成

实验一 观察DNA和RNA在细胞中的分布

实验原理：甲基绿使DNA 呈绿色，吡啰红使RNA 呈红色 ；盐酸改变细胞细胞膜的通透性，同时使染色质中的DNA与蛋白质分离

分布：真核生物DNA主要分布在细胞核中，细胞质的线粒体和叶绿体内也含有少量的DNA；RNA主要分布在细胞质中。 原核生物的DNA主要分布在拟核中，质粒中也有少量的DNA。

实验结果: 同时使细胞核呈绿色,细胞质呈红色.

 材料;无色的细胞或浅色的细胞

考点提示

1、  该实验中的细胞是有活性还是死细胞？

答；是死细胞，因为进行了烘干和用盐酸处理

2、  吡罗红甲基绿染色体为什么要使用时现配？

答；因为其不稳定。

3、  乙酸和乙酸钠在实验中起作什么作用？

答；起缓冲作用，维持PH的稳定

4、  为什么有用洋葱鳞片叶的内表皮细胞，而不能用洋葱鳞片叶的外表皮细胞来做此实验？

答；此实验中要求细胞无色或浅色，洋葱鳞片叶的内表皮细胞无紫色的大液泡，而外表皮有

实验二 物质鉴定

还原糖 + 斐林试剂～砖红色沉淀（水浴加热）

脂 肪 + 苏丹III ～橘黄色

脂 肪 + 苏丹IV～ 红色

蛋白质 + 双缩脲试剂 ～紫色反应

1、还原糖的检测

（1）材料的选取：还原糖含量高，白色或近于白色，如苹果，梨，白萝卜。

（2）试剂：斐林试剂（甲液：0.1g/mL的NaOH溶液，乙液：0.05g/mL的CuSO4溶液），现配现用，先混合后使用。

（3）步骤：取样液2mL于试管中→加入刚配的斐林试剂1mL（斐林试剂甲液和乙液等量混合均匀后再加入）→水浴加热2min左右→观察颜色变化（白色→浅蓝色→砖红色）

★模拟尿糖的检测

1、取样：正常人的尿液和糖尿病患者的尿液

2、检测方法：斐林试剂（水浴加热）或班氏试剂或尿糖试纸

3、结果：（用斐林试剂检测）试管内发生出现砖红色沉淀的是糖尿病患者的尿液，未出现砖红色沉淀的是正常人的尿液。

4、分析：因为糖尿病患者的尿液中含有还原糖，与斐林试剂发生反应产生砖红色沉淀，而正常人尿液中无还原糖，所以没有发生反应。

2、脂肪的检测

（1）材料的选取：含脂肪量越高的组织越好，如花生的子叶。

（2）步骤：

制作切片（切片越薄越好,有单层细胞）将最薄的花生切片放在载玻片中央

染色（滴苏丹Ⅲ染液2～3滴切片上→2～3min后吸去染液→滴体积分数50%的酒精洗去浮色→吸去多余的酒精）

↓

制作装片（滴1～2滴清水于材料切片上→盖上盖玻片）
↓

镜检鉴定（显微镜对光→低倍镜观察→高倍镜观察染成橘黄色的脂肪颗粒）

3、蛋白质的检测

（1）试剂：双缩脲试剂（A液：0.1g/mL的NaOH溶液，B液：0.01g/mL的CuSO4溶液）

（2）步骤：试管中加样液2mL→加双缩脲试剂A液1mL，摇匀→加双缩尿试剂B液4滴，摇匀→观察颜色变化(紫色)

考点提示：

（1）       常见还原性糖与非还原性糖有哪些？

答；葡萄糖、果糖、麦芽糖都是还原性糖；淀粉、蔗糖、纤维素都是非还原性糖。

（2)还原性糖植物组织取材条件？

答；含糖量较高、颜色为白色或近于白色，如：苹果、梨、白色甘蓝叶、白萝卜等。

（3)研磨中为何要加二氧化硅？不加石英砂对实验有何影响？

答；加二氧化硅是为了使研磨更充分。不加二氧化硅会使组织样液中还原性糖减少，使鉴定时溶液颜色变化不明显。

（4）斐林试剂甲、乙两液的使用方法？混合的目的？为何要现混现用？

答；混合后使用；产生氢氧化铜；氢氧化铜不稳定。

（5)还原性糖中加入斐林试剂后，溶液颜色变化的顺序为：答；浅蓝色 棕色 砖红色

（6）花生种子切片为何要薄？答；只有很薄的切片，才能透光，而用于显微镜的观察。

（7）转动细准焦螺旋时，若花生切片的细胞总有一部分清晰，另一部分模糊，其原因一般是什么？

答；切片的厚薄不均匀。

（8）脂肪鉴定中乙醇作用？答；洗去浮色。

（9）双缩脲试剂A、B两液是否混合后用？先加A液的目的。怎样通过对比看颜色变化？

答；不能混合；先加A液的目的是使溶液呈碱性；先留出一些大豆组织样液做对比。

实验三 观察叶绿体和细胞质流动

1、材料：新鲜藓类叶、黑藻叶或菠菜叶，口腔上皮细胞临时装片

2、原理：叶绿体在显微镜下观察呈绿色,球形或椭球形。用健那绿染液染色后的口腔上皮细胞中线粒体成蓝绿色,细胞质接近无色。

3、操作步骤：  取材 制片 低倍观察 高倍观察

考点提示：

（1)           为什么可直接取用藓类的小叶来观察叶绿体，而不能直接取用菠菜叶？能它用藓类的小叶来观察线粒体

答；因为藓类的小叶很薄，只有一层细胞组成，而菠菜叶由很多层细胞构成。不能，因为其绿色的叶绿体对染色后的线粒体颜色有干扰

（2）       取用菠菜叶的下表皮时，为何要稍带些叶肉？

答；表皮细胞除保卫细胞外，一般不含叶绿体，而叶肉细胞含较多的叶绿体。

（2)           怎样加快黑藻细胞质的流动速度？最适温度是多少？

答；进行光照、提高水温、切伤部分叶片；25℃左右。

（3）       对黑藻什么部位的细胞观察，所观察到的细胞质流动的现象最明显？

答；叶脉附近的细胞。

（4）       若视野中某细胞中细胞质的流动方向为顺时针，则在装片中该细胞的细胞质的实际流动方向是怎样的？

答；仍为顺时针。

（6）是否一般细胞的细胞质不流动，只有黑藻等少数植物的细胞质才流动？

答；否，活细胞的细胞质都是流动的。

（7）若观察植物根毛细胞细胞质的流动，则对显微镜的视野亮度应如何调节？

答；视野应适当调暗一些，可用反光镜的平面镜来采光或缩小光圈。

（8）在强光照射下，叶绿体的向光面有何变化？答；叶绿体的受光面积较小有一面面向光源。
 

实验四 用高倍镜观察线粒体和叶绿体

一．实验目的：使用高倍镜观察叶绿体（原色观察）和线粒体的形态分布。

二．实验原理：

叶绿体的辨认依据：叶绿体是绿色的，呈扁平的椭圆球形或球形。

线粒体辨认依据：线粒体的形态多样，有短棒状、圆球状、线形、哑铃形等。健那绿染液是专一性染线粒体的活细胞染料，可以使活细胞中线粒体呈现蓝绿色。

三．实验材料：

观察叶绿体时选用：藓类的叶、黑藻的叶。取这些材料的原因是：叶子薄而小，叶绿体清楚，可取整个小叶直接制片，所以作为实验的首选材料。

若用菠菜叶作实验材料，要取菠菜叶的下表皮并稍带些叶肉。因为表皮细胞不含叶绿体。

四．方法步骤：

步 骤 注 意 问 题 分 析

1．制片。用镊子取一片黑藻的小叶，放入载玻片的水滴中，盖上盖玻片。 制片和镜检时，临时装片中的叶片不能放干了，要随时保持有水状态 否则细胞或叶绿体失水收缩，将影响对叶绿体形态和分布的观察。

2．低倍镜下找到叶片细胞

3．高倍镜下观察叶绿体的形态和分布

4．制作人的口腔上皮细胞临时装片 在洁净载玻片中央滴一滴健那绿染液→用牙签取碎屑→盖盖玻片

5．观察线粒体 蓝绿色的是线粒体，细胞质接近无色。

讨论：

1、  细胞质基质中的叶绿体，是不是静止不动的？为什么？

答：不是。呈椭球体形的叶绿体在不同光照条件下可以运动，这种运动能随时改变椭球体的方向，使叶绿体既能接受较多光照，又不至于被强光灼伤。

2、  叶绿体的形态和分布，与叶绿体的功能有什么关系？

答：叶绿体的形态和分布都有利于接受光照，完成光合作用。如叶绿体在不同光照条件下改变方向。又如叶子上面的叶肉细胞中的叶绿体比下面的多，这可以接受更多的光照。

实验五 观察有丝分裂

1、材料：洋葱根尖（葱，蒜）

2、步骤：（一）洋葱根尖的培养

（二）装片的制作

制作流程：解离→漂洗→染色→制片

1.       解离: 药液: 质量分数为15%的盐酸,体积分数为95%的酒精(1 : 1混合液).

时间: 3~5min .目的: 使组织中的细胞相互分离开来.

2. 漂洗: 用清水漂洗约10min. 目的: 洗去药液,防止解离过度,并有利于染色.

3. 染色: 用质量浓度为0.01g / mL或0.02g / mL的龙胆紫溶液(或醋酸洋红液)染色3~ 5min

目的: 使染色体着色,利于观察.

4. 制片: 将根尖放在载玻片上,加一滴清水,并用镊子把根尖弄碎,盖上盖玻片,在盖玻片上再加一片载玻片. 然后用拇指轻轻地按压载玻片. 目的: 使细胞分散开来,有利于观察.

（三）观察

1、先在低倍镜下找到根尖分生区细胞：细胞呈正方形，排列紧密,有的细胞正在分裂。

2、换高倍镜下观察：先找到分裂中期→分裂前、后、末期→分裂间期。（注意各时期细胞内染色体形态和分布的特点）。其中，处于分裂间期的细胞数目最多。

考点提示：

（1)           培养根尖时，为何要经常换水？

答；增加水中的氧气，防止根进行无氧呼吸造成根的腐烂。

（2）培养根尖时，应选用老洋葱还是新洋葱？为什么？

答；应选用旧洋葱，因为新洋葱尚在休眠，不易生根。

（3）为何每条根只能用根尖？取根尖的最佳时间是何时？为何？

答；因为根尖分生区的细胞能进行有丝分裂；上午10时到下午2时；因为此时细胞分裂活跃。

（4）解离和压片的目的分别是什么？压片时为何要再加一块载玻片？

答；解离是为了使细胞相互分离开来，压片是为了使细胞相互分散开来；再加一块载玻片是为了受力均匀，防止盖玻片被压破。

（5）       若所观察的组织细胞大多是破碎而不完整的，其原因是什么？

答；解离过度，压片时用力过大。

（6)解离过程中盐酸的作用是什么？丙酮可代替吗？

答；分解和溶解细胞间质；不能，而硝酸可代替。

（7)为何要漂洗？

答；洗去盐酸，便于染色。

（8)细胞中染色最深的结构是什么？

答；染色最深的结构是染色质或染色体。

（9）若所观察的细胞各部分全是紫色，其原因是什么？

答；染液浓度过大或染色时间过长。

（10）为何要找分生区？分生区的特点是什么？能用高倍物镜找分生区吗？为什么？

答；因为在根尖只有分生区的细胞能够进行细胞分裂；分生区的特点是：细胞呈正方形，排列紧密，有的细胞处于分裂状态；不能用高倍镜找分生区，因为高倍镜所观察的实际范围很小，难以发现分生区。

（11）分生区细胞中，什么时期的细胞最多？为什么？

答；间期；因为在细胞周期中，间期时间最长。

（12）所观察的细胞能从中期变化到后期吗？为什么？

答；不能，因为所观察的细胞都是停留在某一时期的死细胞。

（13）观察洋葱表皮细胞能否看到染色体？为什么？

答；不能，因为洋葱表皮细胞一般不分裂。

（14）若观察时不能看到染色体，其原因是什么？

答；没有找到分生区细胞；没有找到处于分裂期的细胞；染液过稀；染色时间过短。

实验六比较酶和Fe3+的催化效率

考点提示：

（1）       为何要选新鲜的肝脏？

答；因为在不新鲜的肝脏中，过氧化氢酶的活性会由于细菌的破坏而降低。

（2）       （2）该实验中所用试管应选较粗的还是较细的？为什么？

答；应选用较粗的，因为在较细的试管中容易形成大量的气泡，而影响卫生香的复燃。

（3）       为何要选动物的肝脏组织来做实验，其他动植物的组织的研磨液能替代吗？

答； 因为肝脏组织中过氧化氢酶含量较丰富；其它动植物组织也含有少量的过氧化氢酶，所以能够替代。

（4）       相同质量的块状肝脏和肝脏研磨液，哪一个催化效果好？为什么？

答‘研磨液效果好；因为它增加过氧化氢酶与过氧化氢的接触面积。

（5）       滴入肝脏研磨液和氯化铁溶液时，可否共用下个吸管？为什么？

答‘不可共用，防止过氧化氢酶与氯化铁混合，而影响实验效果。

（6）能不能在低温和高温的条件下来做此实验

答； 不能，因为低温条件下，酶的活性受到了抑制，而高温条件下，可能酶的分子结构遭到破环，活性较低。

实验七 色素的提取和分离

1、  原理：叶绿体中的色素能溶解在有机溶剂丙酮或无水乙醇——提取色素

各色素在层析液中的溶解度不同,随层析液在滤纸上扩散速度不同——分离色素

2、步骤：

（1）提取色素 研磨

（2）制备滤纸条

（3）画滤液细线：均匀，直，细，重复若干次

（4）分离色素：不能让滤液细线触及层析液

（5）观察和记录: 结果滤纸条上从上到下依次为:橙黄色(胡萝卜素)、黄色(叶黄素)、蓝绿色(叶绿素a)、黄绿色(叶绿素b

考点提示：

（1）       对叶片的要求？为何要去掉叶柄和粗的时脉？

答；绿色、最好是深绿色。因为叶柄和叶脉中所含色素很少。

（2）       二氧化硅的作用？不加二氧化硅对实验有何影响？

答；为了使研磨充分。不加二氧化硅，会使滤液和色素带的颜色变浅。

（3）       丙酮的作用？它可用什么来替代？用水能替代吗？

答‘溶解色素。它可用酒精等有机溶剂来代替，但不能用水来代替，因为色素不溶于水。

（4）       碳酸钙的作用？不加碳酸钙对实验有何影响？

答；保护色素，防止在研磨时叶绿体中的色素受到破坏。不加碳酸钙，滤液会变成黄绿色或褐色。

（5）研磨为何要迅速？要充分？过滤时为何用布不用滤纸？答；研磨迅速，是为了防止丙酮大量挥发；只有充分研磨，才能使大量色素溶解到丙酮中来。色素不能通过滤纸，但能通过尼龙布。
（6）滤纸条为何要剪去两角？答；防止两侧层析液扩散过快。

（7）为何不能用钢笔或圆珠笔画线？答；因为钢笔水或圆珠笔油中含有其它色素，会影响色素的分离结果。

（8） 滤液细线为何要直？为何要重画几次？

答；防止色素带的重叠；增加色素量，使色素带的颜色更深一些。

（9） 滤液细线为何不能触到层析液？

答；防止色素溶解到层析液中。

（10）滤纸条上色素为何会分离？

答；由于不同的色素在层析液中的溶解度不同，因而它们随层析液在滤纸条上的扩散速度就不同。
（11）色素带最宽的是什么色素？它在层析液中的溶解度比什么色素大一些？

答；最宽的色素带是叶绿素a，它的溶解度比叶绿素b大一些。

（12）滤纸条上相互间距最大的是哪两种色素？ 答；胡萝卜素和叶黄素。

（13)色素带最窄的是第几条色素带？为何？

答；第一条色素带，因为胡萝卜素在叶绿体的四种色素中含量最少。