一、常用试剂及作用:
1、斐林试剂: 成分:
2、双缩脲试剂:成分:
3、苏丹Ⅲ:用法:取苏丹Ⅲ颗粒溶于95%的酒精中,摇匀。用于检测脂肪。可将脂肪染成橘黄色(被苏丹Ⅳ染成红色)。
4、甲基绿吡罗红:用于鉴定DNA、RNA。DNA遇甲基绿(常温)会被染成蓝绿色,吡罗红使RNA呈现红色。
5、二苯胺:用于鉴定DNA。DNA遇二苯胺(沸水浴)会被染成蓝色。
6、50%的酒精溶液: 脂肪鉴定中洗去浮色。
6、95%的酒精溶液:冷却的体积分数为95%的酒精可用于凝集DNA。
7、15%的盐酸:和95%的酒精溶液等体积混合可用于解离根尖。
8、龙胆紫溶液:(浓度为
9、20%的肝脏、3%的过氧化氢、3.5%的氯化铁:用于比较过氧化氢酶和Fe3+的催化效率。(新鲜的肝脏中含有过氧化氢酶)。
10、3%的可溶性淀粉溶液、3%的蔗糖溶液、2%的新鲜淀粉酶溶液:用于探索淀粉酶对淀粉和蔗糖的作用实验。
11、碘液:用于鉴定淀粉的存在。淀粉遇碘变蓝色。
12、无水乙醇(或丙酮):用于提取叶绿体中的色素。
13、层析液:(成分:20份石油醚、2份丙酮、和1份苯混合而成,也可用93号汽油)可用于色素的层析,可将色素在滤纸上分离开。
14、二氧化硅:在色素的提取的分离实验中研磨绿色叶片时加入,可使研磨充分。
15、碳酸钙:研磨绿色叶片时加入,可中和有机酸,防止在研磨时叶绿体中的色素受破坏。
16、
17、
18、氯化钠溶液:①可用于溶解DNA。当氯化钠浓度为2mol/L、 0.015mol/L时DNA的溶解度最高,在氯化钠浓度为0.14 mol/L时,DNA溶解度最高。②浓度为0.9%时可作为生理盐水。
19、胰蛋白酶(胶原蛋白酶):①可用来分解蛋白质。②可用于动物细胞培养时分解组织使组织细胞分散成单个细胞。
20、秋水仙素:人工诱导多倍体试剂。用于萌发的种子或幼苗,可使染色体组加倍,原理是可抑制正在分裂的细胞纺缍体的形成。
21、氯化钙:增大细菌细胞壁的通透性
22、溴麝香草酚蓝:CO2可使溴麝香草酚蓝水溶液由蓝变绿再变黄。
23、重铬酸钾溶液:橙色的重铬酸钾溶液,在酸性条件下与乙醇发生反应,变成灰绿色。
24、健那绿:健那绿染液是将活细胞中线粒体染色的专一性染料,可以使活细胞中的线粒体呈现蓝色,而细胞质接近无色。
二、斐林试剂和双缩脲试剂的比较:
相同点:
1、 由NaOH溶液和CuSO4溶液构成;
2、 斐林试剂甲液和双缩脲试剂A都为0.
不同点:
3、 CuSO4溶液浓度不一样:斐林试剂乙液为0.
4、配制比例不一样。
5、使用方法不一样:斐林试剂是甲、乙液一起混合后再使用,双缩脲试剂则是先向待鉴定材料加入A试剂摇匀后,再加入试剂B。
6、反应条件不一样:婓林试剂需水浴加热,双缩脲试剂不需要水浴加热。
7、鉴定的对象不一样:斐林试剂鉴定的是还原糖,双缩脲试剂鉴定的是蛋白质。
三 实验方法:
(1)实验结果的显示方法:
①光合速率——O2释放量或CO2吸收量或淀粉产生量
②呼吸速率——O2吸收量或CO2释放量或淀粉减少量
③原子转移途径——放射性同位素示踪法
④细胞液浓度大小——质壁分离
⑤细胞是否死亡——质壁分离
(2)实验条件的控制方法:
①增加水中氧气——泵入空气或吹气或放入绿色植物
②减少水中氧气——容器密封或油膜覆盖或用凉开水
③除去容器中CO2——NaOH溶液
④除去叶片中原有淀粉——置于黑暗环境
⑤除去叶片中叶绿素——酒精隔水加热
⑥除去光合作用对呼吸作用的干扰——给植株遮光
⑦如何得到单色光——棱镜色散或彩色薄膜滤光
⑧血液抗凝——加入柠檬酸钠
⑨线粒体提取——细胞匀浆离心
⑩灭菌方法——微生物培养的关键在于灭菌,对不同材料,灭菌方法不同:培养基用高压蒸气灭菌;接种环用火焰灼烧灭菌;双手用肥皂洗净,擦干后用75%酒精消毒;整个接种过程都在实验室无菌区进行。
(3)实验中控制温度的方法:
①还原糖鉴定:50
②酶促反应:水浴保温
③用酒精溶解叶中的叶绿素:酒精要隔水加热
④DNA的鉴定:水浴煮沸加热
⑤细胞和组织培养以及微生物培养:恒温培养
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